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孔雀石綠檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液方法
更新時間:2021-03-11   點(diǎn)擊次數(shù):1329次

孔雀石綠檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液:

標(biāo)準(zhǔn)品溶液(0ppb,0.05ppb,0.1ppb,0.2ppb,0.4ppb,0.8ppb)

取6個1.5ml離心管,把標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋10倍(如:450ul標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加入50ul10×標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液)

6.1編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

6.2活化:加120ul活化劑工作液(配液B)到微孔中,室溫下反應(yīng)10min,倒掉拍干,加洗滌工作液(配液A)250ul/孔,洗滌5次,每次間隔30s,棄去孔中液體,在吸水紙上拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的吸頭戳破)。

6.3加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應(yīng)30分鐘。

6.4洗滌:將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液工作液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,后用吸水紙拍干。

6.5加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,37℃避光反應(yīng)30分鐘。

6.6洗滌:同上

6.7顯色:加底物液A50µl/孔,再加底物液B50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘。

6.8終止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。

6.9測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

 

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